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Testes disponíveis
Reação em cadeia de polimerase (PCR)
- Detecta a presença de sequências específicas do ácido nucleico viral (RNA).
- Tipos de amostra: soro ou tecidos.
- Prós:
- Método mais sensível e preferido de detecção do agente.
- Muitas vezes, as amostras podem ser agrupadas para reduzir custos e minimizar a perda de sensibilidade.
- Contras:
- Custo moderado.
- Requer primers adequados.
Anticorpos fluorescentes (FAT)
- Detecta a presença do vírus
- Tipos de amostras: tecidos, especialmente amígdalas.
- Prós:
- Boa sensibilidade.
- Contras:
- Não faz distinção entre vacinação e infecção por vírus de campo.
- As vacinas vivas modificadas podem dar um FAT positivo por cerca de 2 semanas.
- Não é viável para um grande número de amostras.
- Os resultados dependem da cepa viral usada no teste.
- A confiabilidade depende muito da habilidade dos técnicos.
- Não faz distinção entre vacinação e infecção por vírus de campo.
Imunoperoxidase diferencial usando anticorpos monoclonais (MAbs)
- Detecta a presença do agente.
- Tipos de amostra: amígdala ou outro órgão FAT-positivo.
- Utiliza uma série de três anticorpos monoclonais (MAbs) diferentes para distinguir entre vacinação, infecção por vírus de campo e outros Pestivírus.
- Prós:
- Permite distinguir entre vacinação, infecção por vírus de campo e outros pestivírus.
- Contras:
- Custo moderado a alto.
- Requer uma amostra de tecido FAT positiva.
- Os resultados dependem dos três MAbs diferentes e um anticorpo policlonal (PAbs) usado no teste.
- MAbs que reconhecem todas as cepas virais da PSC..
- MAbs que reconhecem todas as cepas de vacina de PSC usadas naquele país.
- MAbs que reconhecem o vírus da diarreia bovina (BVD) e a doença de fronteira (BD).
- PAbs que reconhecem PSC..
- Não é viável para um grande número de amostras.
- A confiabilidade depende muito da habilidade dos técnicos.
Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA)
- Detecta a presença de anticorpos.
- Tipos de amostra: soro.
- Prós:
- Os animais permanecem positivos por várias semanas.
- Pode ser usado em casos crônicos.
- Pode ser usado para diferenciar a exposição o vírus de campo do vírus da vacina com deleção de genes.
- Qualquer resultado positivo para vírus de campo é considerado significativo.
- Contras:
- Se possível, o ensaio apropriado deve ser compatível com a deleção do gene apropriado na vacina (geralmente E2).
- Os animais levam pelo menos 21 dias para se tornarem soropositivos.
- Pode ocorrer reatividade cruzada com outros pestivírus.
Neutralização viral (VN)
- Detecta a presença de anticorpos.
- Tipos de amostra: soro.
- Prós:
- Os animais permanecem positivos por várias semanas.
- Pode ser usado em casos crônicos.
- Sensibilidade superior ao ELISA (pode detectar uma concentração mais baixa de anticorpos).
- Contras:
- Não é viável para um grande número de amostras.
- Os animais levam pelo menos 21 dias para se tornarem soropositivos.
- Não faz distinção entre vacinação e infecção por vírus de campo.
- A confiabilidade depende muito da habilidade dos técnicos.
- A reatividade depende da cepa viral utilizada.
- Pode ocorrer reatividade cruzada com outros pestivírus.
Interpretação de resultados:
PCR
- Positivo: Vírus de campo ou cepa de vacina está presente.
- Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.
FAT
- Positivo: Vírus de campo ou cepa de vacina está presente.
- Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.
Imunoperoxidase com MAbs
- Positivo: Consulte a tabela 1.
- Negativo: Negativo ou o vírus não é detectado se o teste for feito muito tempo após a infecção.
Tabela 1. Interpretação dos resultados do teste de imunoperoxidase diferencial com anticorpos monoclonais (MAbs). Fonte: OIE.
| Anticorpo policlonal | Anticorpo monoclonal específico para | Interpretação | ||
|---|---|---|---|---|
| Cepa PSC | Cepa vacinal PSC | Cepa BVD/BD | ||
| + | + | — | — | cepa de campo de PSC |
| + | + | + | — | cepa vacinal de PSC |
| + | — | — | + | cepa de BVD/BV |
| + | — | — | — | Outros vírus não PSC Pestivírus* |
* A existência de novas cepas de PSC deve sempre ser levada em consideração e quaisquer isolados de casos suspeitos de PSC devem ser encaminhados a um Laboratório de Referência da OIE.
ELISA
- Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (>21 dias) à vacina ou vírus de campo.
- Negativo: Negativo ou exposição à vacina ou vírus de campo muito recente para ser detectado.
A Tabela 2 ajuda a demonstrar as capacidades DIVA (diferenciação de animais infectados de vacinados) de alguns ensaios ELISA quando uma vacina com exclusão de genes é usada.
| ELISA não diferencial | Resultado ELISA-E2 | Interpretação |
|---|---|---|
| Positivo | Positivo | Animal exposto ao vírus de campo |
| Positivo | Negativo | Animal vacinado não exposto ao vírus de campo |
| Negativo | Positivo | Erro no ensaio, este resultado não é possível |
| Negativo | Negativo | Animal não vacinado e não exposto ao vírus de campo |
VN
- Positivo: Anticorpos maternos ou exposição anterior (>21 dias) à vacina ou vírus de campo.
- Negativo: Negativo ou exposição à vacina ou vírus de campo muito recente para ser detectado.
Situações
É importante notar que alguns países podem exigir a aprovação da autoridade competente antes que qualquer teste do PSC possa ser realizado.
Suspeita de surto agudo de PSC em suínos de qualquer idade e granjas não vacinadas contra PSC
- Coletar sangue de vários animais afetados e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
- Coletar baços e amígdalas de suínos que morreram e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
Suspeita de surto agudo de PSC em suínos de qualquer idade em granjas vacinadas contra PSC
- Coletar sangue de vários animais afetados que não foram vacinados contra PSC nas últimas 2 semanas e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
- Coletar baços ou tecidos e amígdalas de suínos que morreram e analisar por PCR; o agrupamento de amostras pode ser considerado.
- Se o PCR for positivo, teste a amostra de tecido usando FAT e imunoperoxidase com MAbs.
Suspeita de circulação crônica de PSC em suínos de qualquer idade sem mortalidade e granjas não vacinadas contra PSC
- Coletar sangue de 30 suínos com sinais clínicos (amostragem direcionada) ou selecionados aleatoriamente (sem sinais clínicos) e analisar por PCR (pool pode ser considerado) e individualmente por ELISA não diferencial.
Suspeita de circulação crônica de PSC em suínos de qualquer idade sem mortalidade e granjas vacinadas contra PSC
- Coletar sangue de 30 suínos (não vacinados nas últimas 2 semanas) com sinais clínicos (amostragem direcionada) ou selecionados aleatoriamente (sem sinais clínicos) e analisar por PCR (pool pode ser considerado) e individualmente por ELISA não diferencial e ELISA diferencial E2.
