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Diagnóstico laboratorial: Disenteria suína (Brachyspira hyodysenteriae)

Quais métodos de diagnóstico laboratorial posso utilizar para diagnosticar a disenteria suína? Qual devo escolher de acordo com a situação? Como interpreto os resultados?

Testes disponíveis:

Cultivo bacteriano

  • Isolamento de organismos vivos.
  • Tipo de amostra: fezes.
  • Prós:
    • Relativamente barato.
    • A presença de Brachyspira spp.fortemente beta-hemolítico está associado à virulência.
Figura 1. Culturas de placa de Petri em ágar sangue mostrando hemólise alfa, beta e gama. Fonte: Mibilehr https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/deed.ene 
Figura 1. Culturas de placa de Petri em ágar sangue mostrando hemólise alfa, beta e gama. Fonte: Mibilehr https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/deed.ene 

Tabela 1: Relação entre beta-hemólise em Brachyspira spp. e a doença.

Brachyspira spp. Beta-hemólise Enfermidade
B. hyodysenteriae Forte Lesões de desinteria suína
B. hampsonii Forte Lesões de desinteria suína
B. suanatina Forte Lesões de desinteria suína
B. pilosicoli Fraco Colites por espiroquetas
B. murdochii Fraco Colites por espiroquetas
B. intermedia Fraco Colites por espiroquetas
B. innocens Fraco Não patogênica
  • Contras:
    • Menos sensível que o teste de PCR.
    • Crescimento lento (até 10 dias).
    • Requer cultura anaeróbica.
    • Algumas cepas menos virulentas podem ser encontradas em granjas sem sinais clínicos ou lesões.

Suscetibilidade antimicrobiana

  • Teste in vitro: capacidade de um organismo vivo crescer sob concentrações específicas de diferentes antimicrobianos.
  • Tipo de amostra: fezes.
  • Prós:
    • Identificação da suscetibilidade ou resistência de cepas específicas a antimicrobianos comuns.
  • Contras:
    • Requer um isolado bacteriano.
    • Os testes in vitro podem diferir ligeiramente dos resultados in vivo.
    • Alguns antimicrobianos específicos podem não ser incluídos ou podem exigir testes especiais separados.
    • Custo moderado.
    • Os resultados demoram 7 dias.

Histopatologia

  • Avalia a presença de lesões teciduais que podem confirmar a presença da doença.
  • Tipo de amostra: tecidos.
  • Prós:
    • As lesões histopatológicas podem ser altamente sugestivas se muitas espiroquetas forem encontradas próximas às lesões intestinais.
    • Pode detectar formas leves da doença.
  • Contras:
    • Os tecidos intestinais de um animal morto recentemente precisam ser fixados em formol.
    • As lesões são semelhantes a outras doenças.

Esfregaço de impressão

  • Detecta a presença de bactérias.
  • Tipos de amostra: tecido do intestino grosso e fezes.
  • Prós:
    • Fácil de realizar.
      • Coloração inespecífica.
      • Microscopia de campo escuro.
    • Um diagnóstico presuntivo pode ser feito pela detecção de um grande número de espiroquetas.
      Figura 2. Gráfico que mostra a forma espiroqueta de Brachyspira spp. Fonte: Y_tambe. https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/deed.en
      Figura 2. Gráfico que mostra a forma espiroqueta de Brachyspira spp. Fonte: Y_tambe. https://creativecommons.org/licenses/by-sa/3.0/deed.en
    • Você pode identificar números baixos, moderados ou altos de bactérias presentes.
  • Contras:
    • Requer a presença de um número significativamente maior de bactérias em comparação com cultura ou PCR.
    • Não avalia a capacidade hemolítica dos isolados e, portanto, não diferencia cepas não patogênicas, colite espiroqueta e disenteria suína.

Reação em cadeia da polimerase (PCR)

  • Detecta a presença de uma sequência específica de ácido nucleico (DNA) bacteriano.
  • Tipos de amostras: tecido intestinal, swabs fecais, fezes.
  • Prós:
    • Alta sensibilidade.
    • A quantificação por PCR está associada à presença de lesões.
    • Custo moderado.
      • Amostras de fezes ou tecidos geralmente podem ser agrupadas para reduzir custos e minimizar a perda de sensibilidade (especialmente no que diz respeito à relevância clínica).
  • Contras:
    • Alta sensibilidade – confirma a presença de bactérias, mas não de doenças.
    • Primers adequados são necessários para detectar e diferenciar entre Brachyspira spp.

Ensaio imunossorvente ligado a enzima (ELISA)

  • Detecta a presença de anticorpos.
  • Tipo de amostra: soro.
  • Prós:
    • Você pode detectar a infecção no nível de granja.
    • Os anticorpos podem durar vários meses.
    • Os níveis séricos de IgG correlacionam-se com a duração dos sinais clínicos.
  • Contras:
    • As evidências não estão prontamente disponíveis.
    • Baixa sensibilidade e especificidade.
      • Eles são usados ​​para detecção no nível da granja e não para diagnóstico de animais individuais.
    • Os anticorpos específicos e o tempo de detecção podem variar ligeiramente entre os diferentes kits comerciais disponíveis.
    • Frequentemente, os antígenos usados ​​podem ser específicos para determinadas espécies de Brachyspira.
    • Não há correlação entre níveis de anticorpos e proteção.
    • Proteção cruzada entre Brachyspira spp.

Interpretação de resultados:

Cultivo bacteriano

  • Positivo: bactéria presente.
    • Beta-hemólise forte – disenteria suína.
    • Beta-hemólise fraca – espiroqueta ou colite não patogênica.
  • Negativo: Negativo, animal possivelmente previamente tratado com antibióticos ou muito tarde na infecção.

Susceptibilidade antimicrobiana

  • Suscetível: possível boa escolha para tratamento se o antimicrobiano puder atingir o tecido-alvo.
  • Resistente: um antimicrobiano diferente deve ser selecionado.
  • MIC: se MIC (concentração inibitória mínima) for realizada, deve-se garantir que o antimicrobiano selecionado atinja o valor de MIC indicado no órgão-alvo.

Histopatologia

  • Positivo: Espiroquetas encontradas perto das lesões são um diagnóstico presuntivo.

  • Negativo: Sem lesões intestinais.

Esfregaço de impressão

  • Quantidade de espiroquetas presentes:
    • Alto: altamente sugestivo de doença.
    • Moderada: interpretação variável.
    • Baixo: valor questionável (pode ser uma condição não patogênica ou crônica).
    • Ausente: animal possivelmente previamente tratado com antibióticos ou contribuinte não significativo.

PCR

  • Positivo: confirma a presença de bactérias.
  • Negativo: Negativo ou infecção muito antiga para detectar a bactéria ou animal previamente tratado com antibióticos.

ELISA

  • Positivo: Exposição anterior (>2-4 semanas) à vacina ou bactéria de campo.
  • Negativo:
    • Negativo para vacina ou bactéria de campo.
    • Infecção muito antiga para ser detectada.
    • O uso de antibióticos pode inibir o crescimento bacteriano e diminuir a resposta imune.

Casos clínicos:

Suínos de terminação com diarreia (aguda)

  • Coletar amostras fecais de 10 ou mais suínos com diarreia não tratados com antibióticos e enviar para cultura bacteriana e PCR em pools de 5.
  • Necropsia 1-3 suínos mortos recentemente ou sacrificar animais com diarreia.
  • Avaliar o intestino grosso (especialmente o ceco e o cólon espiral) macroscopicamente e fixe em formalina para histopatologia.

História crônica de diagnóstico de disenteria suína, mas sem sinais clínicos observados

  • Coletar amostras de fezes de 4-6 baias e envie para PCR.
  • Coletar amostras de 15 a 20 suínos com 14 e 18 semanas de idade.
    • Duas abordagens para a coleta:
      • Transversal – coleta de diferentes faixas etárias ao mesmo tempo (obtém resultados mais rapidamente).
      • Longitudinal – coleta dos mesmos suínos ao longo do tempo (são obtidos resultados mais precisos).
    • Análise de amostras de soro por ELISA.

Consulte o ''guia de enfermidades'' para mais informações

Disenteria suínaA disenteria suína é causada pela bactéria Brachyspira hyodysenteriae e é caracterizada por diarreia com sangue e muco de intestino grosso que afeta principalmente animais na engorda.

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