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A peste suína africana (PSA) é uma doença viral grave que afeta suínos de todas as idades. Nos últimos anos, devastou a indústria suína em muitos países. O vírus da PSA se espalha muito lentamente e sua disseminação geográfica pode ser reduzida por meio de ações apropriadas. O diagnóstico definitivo e precoce é um elemento fundamental para evitar sua disseminação e o diagnóstico a campo pode ser feito a partir de sinais clínicos e achados de necropsia.
Sinais clínicos:
Na fase inicial da doença, os animais que morrem são frequentemente encontrados com cianose nas pernas, orelhas e extremidades. Muitas vezes há febre alta (40 - 42 ° C); vômito; diarreia, que pode ser sanguinolenta ou escura (foto 1, à direita); depressão; abortos (foto 1, esquerda); secreção nasal sanguinolenta (epistaxe) e aumento das perdas de mortalidade.
Cepas de baixa virulência (ou vacinais) causam uma forma atípica e crônica da doença, com poucas mortes. As matrizes geralmente apresentam doença respiratória crônica e infertilidade. O longo período de tempo para manifestação da doença ou a falta de sinais clínicos entre os suínos é frequentemente interpretado pela granja como um longo período de incubação.
Lesões de necropsia
- A epiglote e a traqueia podem estar vermelhas, e geralmente há pneumonia intersticial com edema interlobular. Às vezes há pleuropneumonia fibronecrótica que lembra App.
- Miocardite fibrinosa e pericardite podem estar presentes, e o tórax e o abdome podem ter excesso de sangue ou líquido serossanguinolento.
- Os linfonodos mesentéricos e, principalmente, os gastro-hepáticos podem estar aumentados, edematosos e com aspecto necro-hemorrágico ao corte (foto 2).
- O baço pode estar aumentado, com múltiplos infartos, ou pode estar com aparência normal.
- O fígado geralmente apresenta sangramento grave.
- Os rins podem apresentar inúmeros derrames e hemorragias petequiais e equimóticas (foto 3). Pode haver edema perirrenal. O estômago muitas vezes apresenta úlceras e o cólon pode ser preenchido com conteúdo sanguinolento. Não é incomum encontrar hemorragias nas vísceras abdominais.
- A meningite fibrinosa pode ser evidente no cérebro.
A necropsia deve ser realizada por profissional preocupado com a biossegurança, embora não apresente riscos específicos em uma granja já infectada, mas fornece informações valiosas que não podem ser obtidas com outros tipos de abordagens diagnósticas.
Técnicas laboratoriais
PCR: O diagnóstico de PSA geralmente é verificado por um teste de ácido nucleico positivo e descartando outras doenças de lesões semelhantes. A mais comum é a PCR para o gene P72. O pulmão (amostra preferida em nosso laboratório), rins, baço, linfonodos, soro e sangue são excelentes amostras para PCR. Cotonetes de fluidos orais são extremamente populares, mas a quantidade de vírus é muito menor do que normalmente encontrado no sangue e nos tecidos, de modo que os falsos negativos são bastante comuns. QPCR de fluorescência e PCR convencional são usados, mas a PCR convencional oferece um caminho prático para o sequenciamento genético.
Quando uma vacina com o gene deletado é usada ou a cepa do vírus PSA com um gene deletado foi acidentalmente introduzida, os testes de ácido nucleico podem falhar em alguns animais porque a quantidade de vírus produzida é muito menor em comparação com o vírus de campo. No entanto, quando as amostras apropriadas de tecido ou sangue estão disponíveis, a análise de ácido nucleico pode ser realizada para detectar os genes deletados do vírus da vacina. Se for obtido um resultado positivo para o gene P72, uma PCR de vacina pode ser realizada para a presença de MGF 360-505 R e DNA de CD2v para determinar se o vírus problema é vírus de campo ou vírus da vacina com o gene deletado.
Amplificação isotérmica mediada por loop (LAMP): oferece uma alternativa de ácido nucleico rápida, barata, flexível e extremamente sensível que requer pouco equipamento e pessoas especializadas e parece adequada para análises em massa, como monitoramento/detecção em frigoríficos.
Sorología: pode ser usado para determinar se os animais foram expostos ao vírus da PSA, quando o tempo decorrido entre a infecção e o teste foi longo o suficiente para que a presença do vírus nos tecidos tenha passado, ou se não temos boas amostras de necropsia.
Há vários kits ELISA disponíveis para analisar a presença de anticorpos para P72, P30 e outros antígenos PSA. Esses testes são frequentemente usados para identificar e geralmente sacrificar grupos de matrizes que foram deliberadamente vacinadas ou acidentalmente expostas ao vírus vacinal ilegal.
Existe um teste de captura rápida de antígeno por ELISA, mas tem sensibilidade muito baixa, portanto seu uso geralmente é limitado aos casos em que se deseja um resultado rápido.
No exame histopatológico vasculite generalizada com infarto, hemorragia e trombose são observadas em múltiplos órgãos, particularmente no pulmão, baço, linfonodos, rins, cérebro e intestino. Há destruição linfóide maciça nos linfonodos e baço e vacuolização dos macrófagos alveolares. Necrose e ulceração do epitélio do cólon são frequentes (foto 4).
O uso da histopatologia para verificar lesões vacinais crônicas típicas com genes deletados pode ser muito útil. Os suínos que receberam essas vacinas de PSA muitas vezes apresentam cicatrizes crônicas ativas e lesões vasculares fibrosantes, incluindo trombos e infartos no intestino, fígado, tecidos linfóides, coração e rins. Os linfonodos podem apresentar áreas hemorrágicas, com necrose e destruição de linfócitos, e áreas com fibrose e cicatrização. Os reprodutores vacinados podem apresentar grandes áreas de necrose e fibrose pulmonar que muitas vezes são confundidas com App crônica. O vírus da vacina pode não matar o suíno, mas muitas vezes não consegue eliminar o vírus.
Lembre-se que a PCR é uma ótima ferramenta, mas não é infalível e dependendo da situação, não é 100% precisa. Isso não quer dizer que não seja uma técnica confiável, pelo contrário, mas ainda, os resultados de PCR são os resultados de um teste de diagnóstico, não um diagnóstico. O profissional encarregado de fazer o diagnóstico deve investigar, usar todas as ferramentas que estão à sua disposição. Quando há suspeita de PSA, medidas de biossegurança devem ser tomadas, ainda mais do que o habitual.
