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ELISA para monitorização da estirpe C da PSC

Nesse trabalho é apresentado um ensaio de imunossorção enzimática competitiva (cELISA) baseado em anticorpos monoclonais neutralizantes (mAbs) com ênfase na substituição do VNT para monitorização pós-vacina da estirpe C.

22 Abril 2021
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O teste de neutralização do vírus (VNT) é amplamente utilizado no estudo serológico da Peste Suína Clássica (PSC) e na avaliação da eficácia das vacinas contra a PSC. No entanto, o VNT é um procedimento lento que requer cultura de células e manipulação de vírus vivos. A vacina da estirpe C da PSC é a mais utilizada para o controle e prevenção da PSC.

Neste estudo, é apresentado um ensaio de imunossorção enzimática competitiva (cELISA) baseado em anticorpos monoclonais neutralizantes (mAbs) é apresentado com ênfase na substituição do VNT para monitorização pós-vacinal da estirpe C.

Foi gerado um anticorpo monoclonal (6B211) com potente atividade neutralizante contra a estirpe C. Um novo cELISA foi estabelecido e otimizado com base na estratégia de que 6B211 pode competir com anticorpos neutralizantes induzidos pela estirpe C no soro de suíno para ligação ao antígeno de captura E2 da estirpe C. Ao adicionar os soros de suíno VNT negativos para a estirpe C (n = 445) e os soros de suíno positivos para VNT com a estirpe C (n = 70), o cELISA baseado em 6B211 mostrou uma sensibilidade de 100% (intervalo de confiança de 95%: 94,87 a 100%) e 100% especificidade (intervalo de confiança de 95%: 100 a 100%). Os anticorpos da estirpe C nos suíno podem ser analisados com o cELISA desde os 7 dias posteriores à vacinação. Ao testar os soros de suíno (n = 139) em paralelo, o cELISA mostrou uma excelente concordância (Kappa = 0,957) com VNT. A taxa de inibição das amostras de soro no cELISA está altamente correlacionada com os seus títulos em VNT (r2 = 0,903). Além disso, os intra e inter ensaios do cELISA exibiram uma repetibilidade aceitável com baixo coeficiente de variações (CV).

Este novo cELISA demonstrou uma excelente concordância e um alto nível de correlação com o VNT. É uma ferramenta segura para a monitorização sorológica da vacinação contra a estirpe C por ser um teste rápido, simples, seguro e rentável que pode ser usado para o controle da resposta imune induzida pela vacina a nível da população.

Wang, L., Mi, S., Madera, R. et al. A neutralizing monoclonal antibody-based competitive ELISA for classical swine fever C-strain post–vaccination monitoring. BMC Vet Res 16, 14 (2020). https://doi.org/10.1186/s12917-020-2237-6

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